谈谈常见的微生物检测方法
□ 四川电力医院 蒋静
在临床微生物检验中，主要检测内容为病原微生物，可结合检测结果评估医院环境状态，为药物治疗提供参考依据，对降低院内感染风险、保证医院治疗质量具有积极意义。那么目前医院中，常见的微生物检测方法有哪些呢？
传统微生物检查技术
临床传统微生物检查技术，主要包括生物鉴定法、培养法、染色法、涂片技术等。其中生物鉴定法主要通过细胞形态（是否有鞭毛、是否有芽孢、是否为杆菌等）、部分细菌对培养基要求特殊性、微生物对噬菌体敏感性、血清学反应、微生物对周围环境资源利用度、控制微生物生长环境等情况进行微生物种类鉴定。培养法在在人为条件下，通过控制养料、氧气、水分、酸碱度等环境状态进行微生物鉴别，常见培养法包括好气微生物的摇床培养法、浅盘培养法、深层培养法，以及厌气微生物的静止状态深层培养法等。染色法为通过不同微生物染色后颜色状态差异进行种类鉴别，包括单染色、复染色两种方法。涂片法多与染色法联合应用，可在镜检下明确微生物数量及种类。
免疫学方法
免疫学方法为临床常见微生物快速检出方法之一，主要通过特异性抗原反应对微生物进行检测，主要方法包括凝集反应、沉淀反应、酶联免疫技术。其中酶联免疫技术为检测病原微生物抗原和抗体时主要检测技术，具快速、操作简便等特点，如在临床应用中使用酶联免疫技术，能够对细胞因子细胞诊断，对结合感染患者诊断敏感性理想。
自动化培养鉴定技术
自动化培养鉴定技术，属传统微生物检测优化方案，如应用血培养仪，可简化传统微生物检测期间需要转种过程，直接形成菌落，并利用菌落感应产生的二氧化碳作为指标，保证诊断灵敏性。同时，因为不同微生物有不同酶系统，分解质也存在差异，因此可以对不同微生物的不同代谢物进行检测。
分子生物学检测技术
目前在对微生物分子生物学检测技术中，主要包括聚合酶链反应、核酸杂交技术两种。前者主要为借助天然DNA的模拟复制方式，在短时间内对待测特异性DNA扩增，可在短时间内将待测基因扩增大百万倍，有效解决限制性问题，多用于细菌耐药性等方面检验。后者主要利用核酸变性及复性特点，在检测时不会受到病菌影响，能够快速检测出病原菌，检测准确率高。
生物芯片检测技术
这种技术主要为，将生物大分子固定在尼龙膜支持物上，形成生物分子电针，经芯片探针与其相互作用后，就可以利用分子杂交信号强度进行微生物检测。目前常见的生物芯片检测技术中，主要包括细胞芯片、DNA芯片、蛋白质芯片等。其中DNA芯片能够通过对部分遗传信息快速获取，以满足临床抗感染药物耐药机制研究，且不会对样本造成污染。
生物传感器
此种技术主要借助生物化学、电化学反应原理完成，通过将生化反应信号转化为电信号，并通过放大电信号提升物质检出能力。此种技术主要用于药物筛选、感染性疾病诊断中。目前最常见的为DNA生物传感器，可检出炭疽芽孢杆菌、埃博拉出血热病毒等多种病毒、毒素。
质谱检测技术
属蛋白质指纹图谱检测技术，尽管在目前研究中，此种诊断技术仍存在较多弊端，但在鉴定微生物方面，可通过辅助激光解吸质谱检测实现自动化微生物实验室，且近年来此种技术也被逐渐应用于耐药机制研究。
微生物检测为临床检验重要检查部分，近年来其检测方式越来越倾向于快速检测方向，尽管在临床应用中，可能仍存在不足之处，但相信随着科技的发展，不足之处可逐渐被克服，进一步提升微生物检验质量。
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