临床微生物检验的染色方法

家庭生活报 2020-01-02 00:34 大字

□ 新津县中医医院陈桥

在临床上，微生物检验需要针对不同的需求确定方法，这样才能确保可靠性。标本染色是临床微生物检验中较常使用的方法，那么常用的染色方法有哪几种呢？

革兰氏染色

革兰氏染色在实际应用中，主要是对细菌进行鉴别的，在细菌学中革兰氏染色的应用较为广泛，一般在标本涂片进行染色，然后与环境之间产生对比，这样就能对细菌的形态进行观察。染色步骤可以总结为：龙胆紫液染色、碘溶液染色、脱色液脱色、沙黄溶液复染、等待干燥、镜检。在染色中也有一些注意事项，比如对操作人员的技术水平要求较高，涂片的选择一般不能太厚，以及要将菌龄控制在20小时左右。

抗酸染色

在初步诊断结核病与麻风病的细菌时，会应用到抗酸染色。在结核杆菌的表面会有一层脂类膜，这类物质会有抗酸性，不容易着色，当对其着色之后，也不容易对其进行脱色。染色时染色液要增强，并且需要利用酸性酒精进行处理，这时就会出现抗酸性细菌与非抗酸性细菌的对比。染色的步骤可以归纳为：干燥涂片、加热5秒、在玻片上滴满石碳酸复红溶液，在室温内持续染色10分钟以上、将染液轻缓冲洗干净、在玻片上酸性酒精溶液进行脱色，流水自玻片一端轻缓冲洗，沥干、滴加亚甲基蓝溶液30~60秒、冲洗玻片，沥干然后进行镜检。

墨汁染色

墨汁染色主要应用于对新型隐球菌的鉴定上，在检验中，原理就是一些糖荚膜物或粘附在菌体的周围，荚膜的存在需要在印度墨汁的应用下才能证明。墨汁中的胶装碳粒会被新型隐球菌所取代，这时就能对菌体进行清楚的观察。检验时的步骤可以总结为：在涂片上滴入一滴墨汁，对其进行染色处理、为防止出现气泡，要用夹子夹起玻片，倾斜放置、10分钟后对其进行观察。在染色过程中，需要注意的是要对墨汁的有效期进行观察，确保墨汁的质量，将新型隐球菌进行分装，温度控制在4℃。

棉兰染色

棉兰染色在应用过程中，是对孢子及真菌的菌丝进行鉴别的。其检验原理主要是由于真菌的菌丝都比较粗大，并且孢子也比较容易分散，通过棉兰染液的应用，能将真菌菌丝及孢子染成亮蓝色，这样就能进行有效的观察。检验的步骤可以总结为：将一滴乳酸酚棉兰染色液滴在玻片上、将标本放置其中、摊开、加温、去除气泡、镜检。在染色过程中需要注意的问题时为准确判断实验的位置，需要在玻片上做好标记，操作人员需要做好防护工作然后在取真菌，真菌的培养时间也需合理控制。

质量控制

第一，革兰染色的质量控制。标准菌株的质量控制，需要采用的菌株为大肠埃希菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923；第二，抗酸染色的质量控制。在阳性对照及阴性对照的选择上，一般会选择龟分枝杆菌ATCC93326与大肠埃希菌ATCC25922；第三，墨汁染色的质量控制。阳性对照与阴性对照分别选择新型隐球菌ATCC32609及白色念珠菌ATCC90029；第四，棉兰染色的质量控制。确保染色背景颜色为淡色，并且要将菌丝与孢子染为蓝色。临床微生物检验染色质量控制，还有操作人员的专业素养有着直接联系，因此操作人员要具备专业的操作技能，同时也要保证操作环境的适宜性，确保检验的可靠性与精准性。

临床微生物检验中染色方法的使用，对我国医疗卫生事业的发展有着深刻的影响，有助于提升疾病的治疗效果，并且具有针对性的进行治疗，确保治疗的专业性与可靠性。

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