【科技视野】在P3实验室里新冠病毒这样被“揪出来”
龙跃梅
“这里是与病毒‘零距离’接触的地方，整个实验室完全密封，室内处于负压状态，我们喜欢用‘三流’来形容它，即人流、物流、气流的单向流动，确保在里面的污染物不会泄漏到外面而造成污染。”广东省第二人民医院P3实验室主任林剑国说。而他说的“这里”指的就是P3实验室（生物安全防护三级实验室）。
实验室内的检测流程可分为5个步骤：样本进入“传递窗”—灭活处理—开盖加样和核酸提取—扩增反应判断结果—高压灭菌。
第一步，采集的检测样本如咽拭子或肛拭子，在进入P3实验室前就得先进入一个特殊的窗口——“传递窗”，这个窗口也叫AirLock，空气锁，顾名思义，与空气有关。这个传递窗有不能同时打开的双重门，保证传递样本时带进去的空气被隔离在双重门中，确保实验室外的环境不受污染。
第二步，样本在水浴箱经半个小时56℃的高温灭活，使病毒蛋白不再有生理活性，失去感染、致病和繁殖能力，使实验员在对样本进行检测时相对安全，但是病毒蛋白的基因序列并没有受到影响。
第三步，进行开盖加样和核酸提取。
第四步，提取的核酸送到核酸检测室内，就要上仪器了。提取的核酸加入扩增试剂中，通过荧光PCR仪进行RT-PCR反应，先将提取的核酸逆转录成DNA，再以DNA为模版，对特定位点进行扩增，利用不同的温度进行变性、退火和延伸，每个循环采集荧光值，45个循环后绘制荧光曲线，用时约110分钟，实验员根据荧光曲线分析判断结果的阴性和阳性。
第五步，实验过程产生的污物通过高压灭菌后，按相关普通医疗垃圾处理。
任何一个环节出现问题都可能导致检测结果差错。因此，为保障检测的质量，检测结果将经历重重的比对与复核。在检测过程中，实验员始终保持谨慎的态度进行每一次测试，不错过任何一个可疑样本，针对可疑样本还会选用不同的试剂进行复核确定；其次，按照流程，每进行一批实验，均会随机插入三个以上空白对照，针对阳性样本还会进行病毒基因的测序比对，以防止“假阳性”的出现。
在操作中，实验员面对眼前的样本，需要“一个一个地揭开盖子，进行开盖加样和核酸提取”，这无疑是与病毒的正面交锋。核酸检测的宗旨是高效、有序和安全。实验员要进入P3实验室，首先应在清洁区内穿戴中级防护服，通过缓冲间进入实验室负压工作间，在这里进行标本处理，核酸提取及检测完毕后进行空间、表面消毒，再按顺序脱下防护服，通过淋浴间更衣后，回到清洁区。这些步骤必须严格执行，一个都不能少。（摘自《科技日报》）
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